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延伸內(nèi)容
詳情介紹： iTRAQ和tmt的技術(shù)原理wq一樣，不同的是二者的分子結(jié)構(gòu)有差異。與SILAC相比（標(biāo)記蛋白質(zhì)），iTRAQ和TMT是對肽段進(jìn)行標(biāo)記的。依據(jù)iTRAQ／TMT標(biāo)簽的質(zhì)量數(shù)差異，通過MS實(shí)現(xiàn)對多組樣品中的蛋白質(zhì)進(jìn)行相對定量：SILAC是通過一級MS（ MSl）對蛋白質(zhì)進(jìn)行定量，而iTRAQ／TMT是通過二級MS（ MS／MS．MS2）進(jìn)行定量的iTRAQ／TMT幾乎能兼容有來源的蛋白質(zhì)樣品，并且能同時(shí)分析多達(dá)8-10組的樣品，分析通量高。iTRAQ定量蛋白質(zhì)組學(xué)1、分別提取蛋白質(zhì)并定量；2、Trypsin分別對蛋白進(jìn)行酶解，提取肽段；3、用不同質(zhì)量數(shù)的iTRAQ／TMT標(biāo)簽分別對肽段樣品進(jìn)行標(biāo)記：4、標(biāo)記完成后，混合樣品，用SCX進(jìn)行組分分離（15-20組分）；5、對每個(gè)組分進(jìn)行LC-MS分析：6、蛋白質(zhì)鑒定與定量分析，篩選差異表達(dá)的蛋白；7、生物學(xué)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證（Western blot，EUSA等）：iTRAQ定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)優(yōu)勢1、高通量，能同時(shí)進(jìn)行多達(dá)8-10組樣品蛋白質(zhì)組的定性與定量分析；2、幾乎兼容有來源的樣品（動(dòng)植物組織、xj、血液等）；3、實(shí)驗(yàn)周期。
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